本試驗(yàn)測(cè)試了日糧中添加腸桿菌肽對(duì)肉雞的影響，表明腸桿菌肽可以提高生長(zhǎng)性能，改善腸道形態(tài)，減輕炎癥，并影響糞便微生物區(qū)系組成。證明了腸桿菌肽是優(yōu)秀的抗生素替代物。
腸桿菌肽對(duì)大腸桿菌和沙門(mén)氏菌攻毒條件下肉雞生長(zhǎng)性能、免疫調(diào)節(jié)和腸道菌群的影響
本研究旨在探討腸桿菌肽對(duì)肉仔雞生長(zhǎng)性能、免疫調(diào)節(jié)和腸道微生物區(qū)系的影響。試驗(yàn)選用1日齡AA肉雞（公雞）3120只，隨機(jī)分為5組，每組12個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)52只雞。試驗(yàn)分為對(duì)照組、攻毒組、不同劑量腸桿菌肽組(0.5 mg/kg、1 mg/kg)和20 mg/kg硫酸粘菌素。與攻毒組相比，腸桿菌肽組體重增加2.6%，總體料重比顯著降低4.2%，糞便中厭氧細(xì)菌總數(shù)和大腸桿菌數(shù)量減少，沙門(mén)氏菌感染率也較低，并且十二指腸、空腸和回腸的絨毛高度以及十二指腸和空腸的絨隱比均大于攻毒組。此外，腸桿菌肽還能線性提高十二指腸和空腸的絨毛高度。加入腸桿菌肽后，小鼠血清中TNF-α、IL-1β和IL-6的濃度較攻毒組明顯降低。第21天時(shí)，腸桿菌肽可線性降低IL-6水平。綜上所述，日糧中添加腸桿菌肽有效地改善了肉仔雞的生產(chǎn)性能、全身炎癥反應(yīng)和腸道微生物區(qū)系組成。
本研究采用完全隨機(jī)設(shè)計(jì)，對(duì)3120只1日齡AA公雞進(jìn)行了為期42天的飼養(yǎng)試驗(yàn)。為了達(dá)到肉雞的營(yíng)養(yǎng)需要，配制了不含抗生素和不含抗球蟲(chóng)的玉米豆粕日糧(NRC，1994)。肉雞隨機(jī)分為5個(gè)處理組，每個(gè)處理12個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)52只雞。
（2）、(3)、(4)、(5)組分別在飲水中加入大腸桿菌AZ1(1×106cfu/g)和沙門(mén)氏菌CVCC519(1×106cfu/g)進(jìn)行攻毒，第8天，各組均停止，給予肉雞正常飲水。
腸桿菌肽對(duì)大腸桿菌AZ1和沙門(mén)氏菌CVCC519的最低抑菌濃度(MIC)
腸桿菌肽對(duì)大腸桿菌AZ1和沙門(mén)氏菌CVCC519的MIC值都為0.5μg/mL。對(duì)陽(yáng)性對(duì)照大腸桿菌ATCC25922的最低抑菌濃度為1μg/mL（表1）。這些結(jié)果表明，腸桿菌肽對(duì)大腸桿菌和沙門(mén)氏菌有較好的抑制作用。
表1：腸桿菌肽對(duì)大腸桿菌AZ1和沙門(mén)氏菌CVCC519的最低抑菌濃度(MIC)
+：細(xì)菌生長(zhǎng)，?：細(xì)菌未生長(zhǎng)
02
生長(zhǎng)性能測(cè)定
與對(duì)照組相比，大腸桿菌和沙門(mén)氏菌攻毒顯著降低了肉雞的體重，顯著增加了料肉比和死亡率(p＜0.05)（表2）。添加0.5 mg/kg和1 mg/kg的腸桿菌肽能顯著抑制大腸桿菌和沙門(mén)氏菌對(duì)肉仔雞生長(zhǎng)性能的影響，降低42日齡料肉比和整個(gè)試驗(yàn)期的死亡率(p<0.05)，提高體重(p<0.05)（表2）。
表2：腸桿菌肽對(duì)大腸桿菌和沙門(mén)氏菌感染下肉雞生產(chǎn)性能的影響
03
糞便細(xì)菌計(jì)數(shù)
糞便細(xì)菌計(jì)數(shù)如圖1所示。與對(duì)照組相比，在大腸桿菌和沙門(mén)氏菌攻毒7天后，糞便中的需氧細(xì)菌總數(shù)、大腸桿菌和沙門(mén)氏菌感染率顯著增加(p<0.05)。第21天和第42天時(shí)，相比于攻毒組，腸桿菌肽組和抗生素組的肉雞糞便中的大腸桿菌數(shù)和總需氧細(xì)菌顯著減少(p<0.05)，但其數(shù)量高于對(duì)照組（圖1）。21d時(shí)，相比于攻毒組，腸桿菌肽組和抗生素組肉雞糞便中的乳酸菌和雙歧桿菌數(shù)顯著增加(p<0.05)，但沙門(mén)氏菌感染率無(wú)顯著影響。42d時(shí)，相比于攻毒組，腸桿菌肽組肉雞的糞便中雙歧桿菌數(shù)量顯著增加(p<0.05)，大腸桿菌和沙門(mén)氏菌數(shù)量顯著降低(p<0.05)。與抗生素組相比，添加腸桿菌肽可顯著降低沙門(mén)氏菌感染率(p<0.05)。
綜上所述，添加腸桿菌肽可降低肉雞腸道有害菌的數(shù)量，并提高有益菌數(shù)量。對(duì)沙門(mén)氏菌抑制效果好于硫酸粘菌素。
圖1：腸桿菌肽對(duì)21日齡和42日齡肉雞糞便中大腸桿菌、乳酸菌、雙歧桿菌和需氧菌總數(shù)以及沙門(mén)氏菌感染率的影響
04
腸道形態(tài)
與對(duì)照組相比，大腸桿菌和沙門(mén)氏菌感染嚴(yán)重破壞了小腸的形態(tài)結(jié)構(gòu)，顯著降低了十二指腸和回腸的絨毛高度、隱窩深度和絨隱比以及空腸絨毛高度和絨隱比(p＜0.05)（表3）。
與攻毒組相比，添加腸桿菌肽顯著增加十二指腸和空腸的絨毛高度和絨隱比（p＜0.05）。飼喂0.5 mg/kg和1 mg/kg 腸桿菌肽的雛雞空腸絨毛高度、絨隱比和十二指腸絨毛高度均顯著高于抗生素組（p＜0.05），1 mg/kg 腸桿菌肽對(duì)腸道形態(tài)損傷有較好的抑制作用。
表3：腸桿菌肽對(duì)肉雞十二指腸、空腸和回腸絨毛高度、隱窩深度和絨隱比的影響
在腸粘膜形態(tài)上也發(fā)現(xiàn)類似的結(jié)果。腸道蘇木精-伊紅染色顯示，在十二指腸和回腸被大腸桿菌和沙門(mén)氏菌攻毒后，腸道出現(xiàn)更廣泛的損傷和更嚴(yán)重的炎癥浸潤(rùn)(圖2)。而腸桿菌肽和抗生素治療可以減輕粘膜損傷(圖2)。
圖2：腸桿菌肽對(duì)肉雞十二指腸、空腸和回腸黏膜形態(tài)的影響
05
血清中免疫因子的濃度
腸桿菌肽對(duì)血清中免疫調(diào)節(jié)因子濃度的影響結(jié)果如圖3所示。大腸桿菌和沙門(mén)氏菌攻毒組小鼠的促炎因子TNF-α、IL-1β和IL-6的分泌量顯著高于其他4組(P＜0.05)。第21天，0.5和1.0 mg/kg 腸桿菌肽組血清中TNF-α、IL-1β和IL-6的水平低于攻毒組，1.0 mg/kg的腸桿菌肽組的IL-6水平低于0.5 mg/kg的腸桿菌肽組。42d時(shí)血清中IL-1β和IL-6濃度與對(duì)照組相近(p＜0.05)。并且，飼喂腸桿菌肽和抗生素日糧的肉雞的細(xì)胞因子是相似的。
綜上所述，1.0 mg/kg的腸桿菌肽抑制促炎因子效果優(yōu)于0.5 mg/kg的腸桿菌肽組，且與硫酸粘菌素效果相似。
圖3：腸桿菌肽對(duì)第21天和第42天血清免疫調(diào)節(jié)因子濃度的影響
總之，在大腸桿菌和沙門(mén)氏菌的攻毒條件下，腸桿菌肽促進(jìn)了肉雞的生長(zhǎng)性能，料肉比降低4.2%，改善腸道形態(tài)，減輕炎癥，并影響了糞便微生物區(qū)系組成。
參考文獻(xiàn)：Wang G, Song Q, Huang S,et al. Effect of Antimicrobial Peptide Microcin J25 on Growth Performance, Immune Regulation, and Intestinal Microbiota in Broiler Chickens Challenged with Escherichia coli and Salmonella. Animals (Basel). 2020 Feb 21;10(2):345. doi: 10.3390/ani10020345.
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